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人参皂苷RA3
到目前为止人们从人参(或红参)中分得多种人参皂苷,包括人参皂苷R0、人参皂苷Ra1、人参皂苷Ra2、人参皂苷Ra3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd等二醇组人参皂苷和人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg2等三醇组人参皂苷。因为二醇组人参皂苷和三醇组人参皂苷具有不同的生物活性,比如说二醇组人参皂苷具有中枢抑制作用、抗溶血作用三醇组人参皂苷则具有中枢兴奋作用及溶血作用。
制备1、总提物的制备:将红参粉碎,以料/液比1:10(g/mL)加入75%乙醇(乙醇水溶液,体积百分浓度,下同),热回流提取3次,每次提取2h,过滤后合并滤液,滤液浓缩干燥得到红参总提物。2、大孔吸附树脂富集总皂苷:以料/液比1:20(g/mL)向红参总提物中加入5%乙醇,搅拌溶解,过滤,上样于D101大孔吸附树脂柱,树脂柱径高比为1:8,上样液体积为1BV,上样速度为2BV/h,上样结束后静置吸附0.5h,先用25%乙醇洗脱10BV,再用75%乙醇洗脱15BV,收集75%乙醇洗脱液,浓缩干燥得红参总皂苷。3、微孔吸附树脂富集目标人参皂苷:以料/液比1:20(g/mL)向红参总皂苷中加入5%甲醇,搅拌溶解,过滤,上样于MCIGELCHP20微孔吸附树脂柱,树脂柱径高比为1:10,上样液体积为1BV,上样速度为2BV/h,上样结束后静置吸附0.5h,先用30%甲醇(甲醇水溶液,体积百分浓度,下同)洗脱8BV,再依次用含有万分之五甲酸(体积百分浓度)的60%、70%、80%甲醇溶液洗脱4BV、3BV、3BV,分别收集第4BV的60%甲醇洗脱液、第3BV的70%甲醇洗脱液、第3BV的80%甲醇洗脱液,分别浓缩干燥得目标人参皂苷A段、目标人参皂苷B段、目标人参皂苷C段。4、高速逆流色谱分离纯化:目标人参皂苷A段以正己烷:正丁醇:乙酸乙酯:乙醇:水(含万分之五冰乙酸,体积百分浓度)=1:2:5:1:6为溶剂体系,静置过夜,两相分离后超声脱气,上相作为固定相,下相作为流动相固定相以20mL/min的流速泵满主机管路后,仪器以900rpm正向旋转,柱温箱25℃,波长225nm下相以2mL/min泵入主机管路,平衡后取10mL用等体积上、下相溶解的浓度为20mg/mL的目标人参皂苷A段溶液进样,进样后进行图谱采集,根据色谱图(如图1)收集人参皂苷Ra2、人参皂苷Ra3色谱峰对应的流出液,分别浓缩干燥得人参皂苷Ra2、人参皂苷Ra3。
用途人参皂苷Ra3是从人参的根茎中提取的,具有高效的抗氧化生物活性。
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