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胰凝乳蛋白酶抑制剂
胰凝乳蛋白酶抑制剂也能降低蛋白质在肠道内的降解,导致氨基酸和肽的生成受到影响,从而影响生物的正常代谢。
应用胰凝乳蛋白酶抑制剂(ChymotrypsinInhibitor,CI)广泛存在于微生物、豆科植物、禾本科植物、节肢动物和哺乳动物等的体内,主要作用是停止、阻止或降低胰凝乳蛋白酶活性。
制备马铃薯胰凝乳蛋白酶抑制剂的制备包括以下几步:①抽提:新鲜马铃薯洗净切碎于7克/升的二亚硫酸钠水洛液浸泡30分钟。去上清液,再加管数入50毫升相同溶液,置入组织捣碎机搅至匀浆。过滤,滤液调至pH3.0,离心,收集离心液。②盐折:5℃下,于离心液中加入固体硫酸钱至70%饱和度,搅拌l小时,离心、沉淀悬浮于同一饱和度的硫酸按中,室温下用whatmaln号滤纸过滤并洗涤。沉淀溶于蒸馏水中今搅拌,过滤,保留滤液。③热处理:滤液置70℃水浴5分钟,过滤,滤液待透析。④透折:滤液入透折袋,置冰箱内对蒸馏水透折48小时,其间更换数次蒸馏水。过滤,滤液冷冻干燥成粉。⑤分离:SephadexG-75凝胶用0.05M,pHs.ZTris·HCI起始缓冲液(内含0.1MKCI)热溶月张,减压去气泡后装柱(20x50厘米)。平衡。20毫克冷冻干粉溶于5毫升缓冲液,离心,上柱。以起始缓冲液洗脱,流速60毫升/小时,分部收集5毫升。测280cm处各管收集液的光吸收值,得洗脱曲线图。分别收集峰I和峰l,冷冻干燥。
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